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关于3M测试片的接种的使用及判读方法

 3M测试片
 
 1.操作方法
 
①未开封时,置于≤8℃冷藏,注意外包装上的保存期限,打开包装时,应在室温条件下。已开封的,应用压条或胶带封口后,置于室温,一个月内用完。
 
②称取样品置于无菌均质袋或均质杯中,加入无菌稀释液搅拌或均质样品,并用稀盐酸或稀氢氧化钠调pH至6.5~7.2。
注意:无菌稀释液不可使用含有柠檬酸盐、酸性亚硫酸盐或硫代硫酸盐的缓冲液,这些稀释液会抑制**的生长。
 
③将测试片置于平坦表面处,保持水平,揭开上层膜,移液器或滴管吸1ml样液垂直滴加在测试片的正中央。然后将上层膜慢慢落下,尽量不要出现气泡,切勿向下滚动上层膜。
 
④将压板的圆形内凹面朝下,放置在上层膜的正中央,然后轻轻压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养基面积上,切不可扭转压板。
 
⑤拿起压板,静置1min以上等待培养基凝固。然后测试片的透明面朝上,*多可叠放20片,置于36℃培养48小时,并保持培养箱的湿度。
 
 2.判读3M测试片方法
 
①菌落总数测试片内,含有一种红色指示染剂,可以使菌落呈现红色便于计数,计算所有红色菌落,不论大小及颜色深浅。
 
②3M检测片菌落计数的适宜计数范围是25~250。
 
③测试片的计数面积约为20cm2。每一个黄色方框的面积是1cm2。当菌落总数超过250个时,为了估计菌落数,可以选择其中一个或几个有代表性的小方框(1cm2)。计算平均菌落数,然后再乘以20可得到测试片上的菌落数。
 
④当测试片上的菌落太多而无法进行计数时,记录为“TNTC”。
 
⑤有很高数量的菌落,使整个生长区域变成粉色,或仅仅在生长边缘区域观察到单个菌落,记录为“TNTC”。
 
⑥有很高的菌落数量,并且有时菌落会出现分布不均匀的情况,记录为“TNTC”。
 
⑦可以看到直径较大的菌落,并且可以计数,但是仔细观察时,会发现非常密集非常细小的菌落分布在计数区域内,此时记录为“TNTC”。
 
⑧很少数量的菌种,会将测试片上的培养基液化,在计数区域内出现一个粉红色的液化区,此时不要记录液化区内的红点,应选择没有被液化区域内的菌落进行计数,选取没有液化部分的几个有代表性的小方格(1cm2)。计算平均菌落数,然后乘以20。得到结果。
 
⑨注意和样品残渣颗粒进行区。有些样品中会含有一些红色的残渣颗粒,菌落应该是红色规则的圆形,而颗粒的形状是不规则的。如果样品以红色颗粒为主(比如辣椒粉),这类样品的菌落总数检测,不宜采用3M菌落总数测试片。
 
3M大肠杆菌/大肠菌群测试片
 
1.操作方法 
操作方法与3M菌落总数测试片基本相同,只是不需要压板,直接把1ml样液加到中间红色圆形区域内,然后将上层膜轻轻放下,尽量不要产生气泡。然后可以轻轻的转动一下纸片,使样液可以均匀地分布在中间红色的圆形区域内。
 
2.判读方法
大肠菌群在纸片上呈现红色菌落,紧贴着菌落有气泡,大肠杆菌在纸片上呈蓝色菌落紧贴菌落有气泡。此时应注意区分只有红色或蓝色菌落而没有气泡的情况,或者气泡不是紧贴着菌落,或者只有气泡无菌落生长,都不应列入计数范围。此外还应区别样品残渣和目标菌落。
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